La biotine est naturellement présente dans une grande variété d'aliments, ce qui permet généralement de couvrir les besoins dans le cadre d'une alimentation équilibrée. Les œufs, le foie, les fruits à coque, les graines, les légumineuses, les champignons, certains poissons et les céréales complètes figurent parmi les principales sources alimentaires.
Dans les compléments alimentaires, la biotine est généralement proposée sous sa forme pure, facilement assimilable par l'organisme. Elle est fréquemment associée à d'autres nutriments, comme le zinc, le sélénium, la vitamine C ou le collagène, dans des formules destinées à soutenir la beauté de la peau, des cheveux et des ongles.